自己动手做，熟能生巧
⚓️PDA培养基
⚓️简介📘
Potato Dextrose Agar
马铃薯 葡萄糖 琼脂
一种半合成培养基，既有一些天然的有机物质，又有一些成分简单或明确的化合物。
琼脂又称琼胶或洋菜，是由海藻加工而成。
其化学性质稳定一般微生物均不能分解利用。
它在95℃热水中溶化成溶胶，冷却到45℃以下时又重新凝固，常用它作为凝固剂。
如果是要制备液体PDA培养基，只要将如下教程中和琼脂和倒平板相关的略去即可。
⚓️制备✋
⚓️1.准备材料（此为1LPDA培养基的量，请按需要照此比例增减）
1L PDA溶液大概可以倒 40个 1/3深的中型平板
| 200g 马铃薯(削成薄片) | 20g 葡萄糖 | 15~20g 琼脂 |
| 1.2L 蒸馏水 | 电子天平 | 3个小烧杯 |
| 1个大烧杯 | 4个250ml三角瓶 | 若干橡皮筋 |
| 4张封口膜(报纸/纱布也行) | 超净台 | 玻璃棒 |
| 高压灭菌锅 | 大纱布 | 平板若干 |
| 称量纸若干 | 加热用的锅 | 药匙 |
⚓️2.配置PDA培养基溶液
向锅中加入1L的水和200g的马铃薯薄片，加热煮沸，注意安全。
煮到马铃薯薄片容易被玻璃棒戳破为止，然后停止加热。
（不建议盖上锅盖，注意匀速搅拌，防止淀粉形成太多泡沫！）
将纱布折叠出8层(或更多层)，贴附在锅口处，也可以悬在烧杯上。
将锅内的悬浊液慢慢过滤进烧杯里，此时注意用烧杯刻度估计出滤液的大致体积T。
锅剩下的滤渣加蒸馏水清洗过滤（此时注意加入的水的体积与T之和不能大于1L，自己把握）。
剩下的土豆泥顺势用纱布包住，挤压出剩液，此时把烧杯里的溶液补到1L。
每个250ml 的三角瓶放入 5g 琼脂和5g 葡萄糖。
液体培养基无需加入琼脂
⚓️3.分装与灭菌
将上述溶液每个 250ml 分装到三角瓶内，用玻璃棒搅匀，初步溶解后用封口膜和橡皮筋封好。
用报纸把平板包起来。
将四个三角瓶和用布或报纸包好的平板放入高压灭菌锅中灭菌。
参数为 121度 ，20 min ，液体灭菌。
在快要完成灭菌前 20min ，开无菌操作台的紫外灯灭菌。
高压灭菌锅工作完后，取出所有物件放在超净台上，打开紫外灯和通风装置，放置5min。
（在台上将平板拿出，垒好。注意：不可在紫外灯开启时操作）
液体培养基到此就OK了
⚓️4.倒平板
关闭紫外灯，开始欢乐地倒平板吧。
倒之前请在水平平面上摇匀培养基。倒的量自己把握，一般占培养基高度的1/3。
倒完一个盖上一个（也可以盖一半来防止蒸汽凝结），三角瓶用完一瓶开一瓶。
全部倒完后，开紫外灯冷却培养基20min。最后将所有平板打包冷藏。
没倒完的三角瓶内的溶液千万不要直接倒洗手池里，找袋子包起来扔垃圾桶。
⚓️一点提醒👨🔬
- 琼脂加入的量取决于琼脂的品质，品质好的15g就够了，品质差的应适当增加。
另外，在夏天气温较高时，适当增加用量。
- 高压灭菌锅在使用前要注意使用前要加蒸馏水到中央小孔相平的水位。
外面的集液装置也要注意不要超过“高”那条线；大筐放下，小筐放上。
- PDA培养基溶液勿倒在下水道里，琼脂凝固后会堵住下水道！
- 紫外灯开启时不要在附近！
- 有任何疑问请询问老师或者学长学姐，切勿擅自操作喔！
⚓️一点图片
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